Соблюдение техники безопасности при работе с кровью. Работа с кровью или другими биологическими жидкостями
В связи с ростом заболеваемости ВИЧ-инфекцией и парентеральными гепатитами В и С увеличивается риск инфицирования медицинских работников во время проведения манипуляций в лечебно-профилактических учреждениях.
Заражение медработника чаще всего проходит при загрязнении кожи и слизистых биологическими жидкостями больного (кровь, сыворотка, ликвор, сперма и др.) и травматизации их во время выполнения медицинских манипуляций (порез, укол, повреждение кожи мелкими отломками кости и др.). Риску профессионального инфицирования больше, всего подвергаются медицинские работники, соприкасающиеся с кровью и ее компонентами. В первую очередь, это сотрудники гематологических, реанимационных, стоматологических, гинекологических, хирургических отделений и отделений гемодиализа, процедурных кабинетов, лабораторий, а также на производстве по заготовке крови, ее компонентов и препаратов.
Учитывая возможную инфицированность крови и биологического материала человека вирусами СПИДа, гепатитов, цитомегаловирусами, рядом онкогенных вирусов, правила профилактики профессионального заражения распространяются на все лечебно-профилактические учреждения независимо от профиля. Эти правила сводятся к максимальному предотвращению возможности загрязнения кожи и слизистых.
Всех пациентов необходимо рассматривать как потенциально инфицированных ВИЧ и другими передаваемыми с кровью инфекциями.
Медицинскому персоналу следует выполнять правила безопасности для защиты кожи и слизистых оболочек при контакте с кровью или жидкими выделениями организма любого пациента:
1. Мыть руки до и после любого контакта с пациентом.
2. При осуществлении манипуляций надевать халат, шапочку, сменную обувь, выходить в которых за пределы лаборатории, отделения запрещается.
3. При выполнении парентеральных манипуляций все имеющиеся на руках повреждения кожи должны быть закрыты напальчниками или лейкопластырем.
4. Рассматривать кровь и жидкие выделения всех пациентов как потенциально инфицированные и работать с ними только в перчатках, которые единожды снятые повторно не используются.
5. Сразу после применения медицинский инструментарии помещать в дезинфицирующий раствор, шприцы и катетеры в специальный контейнер для утилизации острых предметов. Никогда не снимать со шприцев иглодержатели с иглами и не производить никаких манипуляций с использованными иглами.
6. Для предотвращения возможного попадания брызг крови и других биологических жидкостей необходимо пользоваться средствами защиты глаз и лица (маска, очки, щитки-экраны и др.)
7. Рассматривать все белье, запачканное кровью или жидкими выделениями, все образцы лабораторных анализов как потенциально инфицированные.
8. Для дезинфекции применять 3 % и 5 % раствор хлорамина (хлорной извести), 6 % раствор перекиси водорода, 70 0 этиловый спирт.
Все рабочие места, где возможно загрязнение кожных и слизистых покровов медицинских работников кровью и другими биологическими жидкостями, должны быть оснащены аптечкой первой медицинской помощи при аварийных ситуациях.
Аптечка должна храниться в легкодоступном для персонала месте. Необходимо следить за сроком годности входящих в перечень средств. Контроль за готовностью аптечки к работе возлагается на старшую медицинскую сестру структурного подразделения. Все рабочие места должны быть оснащены необходимым количеством дезинфицирующих и моющих средств.
При попадании крови и других биологических жидкостей на спецодежду место загрязнения обработать 3 % или 5 % раствором хлорамина, или 6 % раствором перекиси водорода. Затем обработать перчатки, снять халат, свернуть и сдать для проведения полной дезинфекции. При загрязнении рук кровью или попадании ее на лицо следует немедленно обработать тампоном, смоченным 1 % раствором хлорамина или 70 0 этиловым спиртом, вымыть 2-кратно теплой проточной водой с мылом и насухо вытереть индивидуальным полотенцем.
В аварийных ситуациях, связанных с реальной опасностью заражения в стационарах, микробиологических лабораториях,показана экстренная профилактика (превентивное лечение) антибиотиками или химио-препаратами. Ее назначают при особо опасных инфекциях (чума, холера), ВИЧ-инфекции. В зависимости от степени риска парентерального заражения ВИЧ-инфекцией рекомендуется комбинация 3 препаратов или одного азидотимидина в течение 4 недель.
Важно начинать экстренную профилактику в первые 24 часа после заражения!
Во время вспышки гриппа и других ОРЗ с целью экстренной профилактики показано назначение иммуномодуляторов (иммуностимуляторов) - дибазола, арбидола, а также препаратов, оказывающих вирулицидное действие (ремантадин и др.).
Иммунокорректоры показаны и вне сложных эпидемиологических ситуаций медицинским работникам с иммунодефицитами.
Основные направления разработки программы профилактики внутрибольничной инфекции (ВБИ) у медицинского персонала:
Скрининг медицинского персонала на наличие инфекции:
При приеме на работу,
В плановом порядке,
По эпидемиологическим показаниям.
Разработка критериев:
Приема на работу,
Отстранения от работы,
Ограничения профессиональной деятельности.
Определение профессиональных факторов риска и групп риска в каждом стационаре.
Разработка стандартной технологии выполнения лечебных и диагностических процедур.
Вакцинация медицинского персонала.
Организация диспансерного обследования медицинского персонала:
Выявление и учет заболеваний на основе определения стандартного случая ВБИ,
Определение критериев профессиональных заражений ВБИ,
Лечение профессиональных и непрофессиональных инфекционных заболеваний,
Создание базы данных о заболеваемости персонала и проведенных мероприятиях.
Определение обязанностей администрации больницы и необходимых ресурсов.
Обучение персонала разных типов ЛПУ:
Среднего звена,
Младшего персонала.
I. Все манипуляции, при которых может произойти загрязнение рук, спецодежды (кровью и другими биологическими жидко-
стями больного), необходимо выполнять в резиновых, латексных хирургических перчатках, фартуках.
II. Во избежание попадания биологических жидкостей больного на слизистые при разбрызгивании необходимо работать в лицевых масках, защитных очках либо использовать защитные экраны.
III. Не принимать участие в работе с больными при наличии ссадин на коже рук или поверхностных дефектов кожи. По этой причине временно отстраняются от работы хирурги, стоматологи, гинекологи, операционные и процедурные медсёстры и т.п., имеющие нарушения целостности кожных покровов.
IV . Медперсоналу запрещается приём пищи и курение в лабораториях и помещениях, где проводятся процедуры больным. Для приёма пищи каждый медработник должен иметь индивидуальную посуду, которая хранится отдельно от посуды больных.
V. После любой процедуры, в том числе после парентерального вмешательства, проводится двукратное мытьё рук в тёплой проточной воде с мылом. Руки вытираются индивидуальным полотенцем или одноразовой салфеткой.
VI. Медперсонал, имеющий по роду своей профессиональной деятельности контакт с кровью или её компонентами, подлежит обследованию на наличие австралийского антигена (при поступлении на работу и далее один раз в год).
VII. Медперсонал - носители австралийского антигена - относятся к группе риска и обязаны соблюдать правила личной гигиены, направленные на предупреждение заражения больных вирусным гепатитом В.
VIII. Разборку, мойку, полоскание инструментов, шприцов и всего того, что соприкасалось с биологическими жидкостями больного, проводить только после их дезинфекции. При этом необходимо работать в плотных резиновых перчатках.
IX. Инструменты одноразового применения немедленно после их использования помещать в контейнер с дезраствором, а затем утилизировать согласно Сан ПиН 2.1.7.728-99.
X. Острые предметы, инструменты многоразового использования помещать в прочный контейнер с дезраствором для обеззараживания.
XI. Передавать острые предметы следует рукояткой к берущему (рис. 1.3-1.5). При этом нужно избегать уколов и порезов острыми краями.
XII. В случае загрязнения неповреждённой кожи её необходимо обработать настолько быстро, насколько позволяет безопасность больного (согласно Сан ПиН 2.1.3.1375-03):
Рис. 1.3. Передача шприца и скальпеля.
Рис. 1.4. Передача крючка и ножниц.
Рис. 1.5. Передача иглодержателя с иглой.
√ снять перчатки;
√обработать кожу шариком, обильно смоченным кожным антисептиком;
√вымыть руки с двукратным намыливанием под тёплой проточной водой; √вытереть салфеткой;
√повторно обработать кожным антисептиком (70% этиловым спиртом).
XIII. При попадании крови на слизистые необходимо их тщательно обработать (согласно Сан ПиН 2.1.3.1375-03): √на слизистые оболочки глаз - глаза промыть раствором марганцовокислого калия в воде в соотношении 1:10 000 (раствор готовится ex tempore, 10 мг препарата растворяют в 100 мл дистиллированной воды);
√при попадании в рот, горло - прополоскать 70% этиловым спиртом или 0,05% раствором марганцовокислого калия (раствор готовится ex tempore, 50 мг препарата растворяют в 100 мл дистиллированной воды);
√при попадании в нос - нос промыть слаборозовым 0,05% раствором марганцовокислого калия. XIV. В случае травмы (укола) использованными инструментами необходимо (согласно Сан ПиН 2.1.3.1375-03):
√быстро снять перчатки;
√выдавить кровь из места укола, если её нет, или не останавливать кровотечение в течение 1-2 мин;
√вымыть руки под проточной водой с мылом;
√обработать руки кожным антисептиком (70° этиловым спиртом);
√место укола обработать 5% раствором йода, после высыхания обработать второй раз;
√закрыть место укола (травмы) асептической повязкой;
√надеть новые перчатки;
√ обязательно сообщить администрации и сделать запись в журнале «Учёта аварийных ситуаций сотрудников».
В случае контаминации медперсонала биологическими жидкостями проводится экстренная деконтаминация средствами из аварийной аптечки.
Учебно – методический комплекс
Раздел 3
Решение проблем пациента посредством сестринского ухода
Тема 3.11.
Разработала преподаватель Дрючина Н.В.
согласовано
на заседании ЦМК
Протокол №_____
от «___»_______2013г.
Председатель ЦМК
Боркун Н.М..
Оренбург 2013 г.
Лекция.
Тема 3.11. «Лабораторные и инструментальные методы исследования»
Студент должен иметь представление:
О работе клинико -диагностической лаборатории ЛПУ;
О работе эндоскопического кабинета.
Студент должен знать:
Основные виды лабораторных исследований;
Цели предстоящих лабораторных исследований;
Технику безопасности при работе с биологическим материалом;
Основные виды инструментальных методов исследования;
Цели предстоящих инструментальных исследований;
Подготовку пациента к рентгенологическим и эндоскопическим методам исследования пищеварительной и мочевыделительной системы;
Подготовку пациента к ультразвуковым методам исследования органов брюшной полости и органов малого таза;
Должностные обязанности медицинской сестры эндоскопического кабинета.
План лекции
1.Основные виды и цели предстоящих лабораторных исследований;
2.Техника безопасности при работе с биологическим материалом;
3.Цели предстоящих инструментальных исследований;
4.Основные виды инструментальных методов исследования;
5.Подготовка пациента к рентгенологическим и эндоскопическим методам исследования пищеварительной и мочевыделительной системы;
6.Подготовка пациента к ультразвуковым методам исследования органов брюшной полости и органов малого таза;
7 Должностные обязанности медицинской сестры эндоскопического кабинета.
Лекция.
Тема 3.11. «Лабораторные и инструментальные методы исследования»
1) Клинико-диагностическая лаборатория (КДЛ) - обязательное отделение любой поликлиники или больницы, и, чем крупнее лечебное учреждение, тем более многопрофильна его лаборатория. Современный врач, практически любого профиля, не может работать без точных качественных показателей состояния систем и органов, обмена веществ, защитных резервов организма и т.д., так как на их основе устанавливается диагноз, контролируется течение заболевания и эффективность терапии.
Современные методы медицинских исследований могут быть разделены на две основные группы – лабораторные и инструментальные.
Лабораторные методы состоят в исследовании химических и физических свойств биологических жидкостей и тканей, проб окружающей среды (смывы с поверхностей, пробы воды, почвы, воздуха и др.), а также исследование и идентификация микроорганизмов (бактериология и вирусология), с целью выявления патогенных и условно-патогенных для человека и животных микроорганизмов и разработки методов специфической профилактики и лечения инфекционных болезней.
Основные виды и цели предстоящих лабораторных исследований:
- Взятие мазка из зева и носа.
Определение флоры в полости носа и зева с лечебной, диагностической целью и с целью выявления бактерионосительства.
- Общий анализ мокроты
ЦЕЛЬ: Определение степени воспалительного процесса в бронхолёгочной системе.
- Анализ мокроты на бактериологическое исследование .
ЦЕЛЬ: Определение микрофлоры и чувствительности к антибиотикам
- Анализ мокроты на микобактерии туберкулеза
ЦЕЛЬ: Подтверждение диагноза «Туберкулёз лёгких»
- Общий анализ мочи .
Определение функционального состояния мочевыделительной системы.
- Анализ мочи по Нечипоренко .
- Анализ мочи по Амбурже.
Количественное определение содержания форменных элементов в моче (лейкоцитов, эритроцитов, цилиндров).
- Анализ мочи на сахар .
Подтверждение диагноза сахарного диабета.
- Анализ мочи для бактериологического исследования .
Определение характера и интенсивности бактериурии, определение степени микробной обсемененности почек.
- Анализ мочи по Зимницкому .
Определение концентрационной способности почек (плотности мочи).
- Анализ мочи на диастазу .
Определение функционального состояния поджелудочной железы
-Копрологическое исследование кала.
Определение переваривающей способности различных отделов пищеварительного тракта.
- Кал на яйца гельминтов .
Подтверждение глистной инвазии;
- Кал на скрытую кровь .
Выявление скрытого кровотечения из органов желудочно-кишечного тракта.
- Кал на простейших .
Выявление инвазии простейших
- Кал для бактериологического исследования .
Анализ кишечной микрофлоры, выявление больных или бактерионосителей дизентерией, сальмонеллезом, брюшным тифом.
- Взятие крови из вены для биохимического исследования.
ЦЕЛЬ: диагностическая (определение в крови общего белка и белковых фракций, протромбина, фибриногена, билирубина, холестерина, остаточного азота, сулемовую и тимоловую пробы и др) - для подтверждения врачебного диагноза.
-Взятие крови из вены для исследования на ВИЧ
ЦЕЛЬ: определение наличия антител к вирусу иммунодефицита человека.
-Взятие крови из вены для исследования на RW (реакция Вассермана)
ЦЕЛЬ: подтверждение диагноза «Сифилис».
- Общий анализ крови
ЦЕЛЬ: изучение количественного и качественного состава форменных элементов крови:
Определение количества гемоглобина;
Определение числа эритроцитов;
Расчет цветового показателя;
Определение числа лейкоцитов и соотношение отдельных форм
среди них;
Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ).
У некоторых больных в зависимости от характера заболевания про-
Изводят дополнительные исследования: подсчет ретикулоцитов, тром-
боцитов, определение времени свертывания.
Правила техники безопасности при работе с биологическим материалом.
1. Избегайте непосредственного контакта с биологическими жидкостями. Работайте в резиновых перчатках. Не допускайте боя лабораторной посуды и травм осколками стекла.
2. Обеззараживайте выделения пациентов перед сливом в канализацию.
3. Тщательно дезинфицируйте лабораторную посуду, судно и мочеприемники, петли для забора кала и др.
При попадании выделений пациента на руки следует вымыть руки с мылом, а затем обработать в течение 2-х минут тампоном, смоченным 70% спиртом, и через пять минут ополоснуть проточной водой.
При попадании биологических жидкостей в глаза следует промыть их проточной водой и закапать 1% раствор сульфацила натрия.
ЗАПОМНИТЕ!
В экскрементах, носоглоточных выделениях, мокроте, моче и рвотных массах концентрация ВИЧ крайне низка или ВИЧ не обнаруживается, в связи с этим риск инфицирования при контакте с указанным биологическим материалом возможен лишь при наличии примеси крови.
Однако соблюдать общие меры предосторожности необходимо в любом случае, так как это позволяет предотвратить передачу от пациентов других инфекционных агентов.
В общем виде алгоритм забора, маркировки и транспортировки биологических материалов можно представить следующим образом:
1) вымыть руки;
2) асептически подготовить место работы;
3) взять пробу с соблюдением требований асептики, надеть перчатки, если это необходимо; не кашлять, не чихать, не разговаривать;
4) получить достаточное количество материала;
5) собрать и транспортировать материал в стерильном контейнере;
6) прикрепить этикетку с указанием ФИО пациента, диагноза, отделения, палаты, даты и времени получения материала, цели исследования;
7) правильно хранить и быстро доставлять материал в лабораторию.
Взятие отдельных видов биологического материала производится следующим образом:
I Сбор мочи
1. Объяснить пациенту цель обследования, получить его согласие;
2. Женщинам подмыться тщательно кипяченой водой с мылом, проводя рукой от лобка к крестцу;
3. Осушить правую и левую половые губы и наружное отверстие мочеиспускательного канала;
4. Мужчине взять половой член, отодвинуть крайнюю плоть и вымыть водой с мылом, осушить головку полового члена;
5. Взять емкость для сбора мочи;
6. Первая порция мочи выпускается в унитаз, на анализ берут вторую порцию;
7. Закрывают емкость с мочой и отправляют на анализ.
II.Сбор мокроты
1.Объяснить цель исследования;
2. Накануне вечером почистить зубы;
3. В стерильную посуду, после откашливания не касаясь краев банки сплюнуть мокроту, сразу же закрыть крышку;
4. Мокроту доставить на анализ не позднее двух часов после сбора.
III. Сбор кала
1. Объяснить цель исследования;
2. Вариант 1. Взятие кала из прямой кишки стеклянной палочкой: Надеть перчатки, левой рукой раздвинуть ягодицы, правой рукой взять из пробирки стеклянную палочку, ввести вращательными движениями в прямую кишку на глубину 6-8 см., извлечь палочку и поместить в пробирку с консервантом.
3. Вариант 2. Взятие кала после опорожнения кишечника. В сухое чистое судно опорожняется кишечник. Стерильным шпателем взять кал, слизь, гной в стерильную банку. Отправить в санбаклабораторию.
IV. Мазок из зева
2. Материал берется натощак или не ранее чем через 2 часа после еды, питья, полоскания горла;
3. Попросить пациента широко открыть рот;
4. Левой рукой придавить шпателем корень языка;
5. Правой рукой осторожно ввести стерильный тампон и снять налет на границе пораженного участка. Материал поместить в стерильную пробирку;
V. Мазок из носа
1. Объяснить цель обследования;
2. Левой рукой приподнять кончик носа;
3. Правой рукой взять стерильную палочку с ватным тампоном и вращательными движениями ввести в носовой ход на глубину 1-2см;
4. Полученный материал помещают в стерильную пробирку;
7. Литература
Основная
Кузнецов Н.А., Бронтвейн А.Т. Уход за хирургическими больными: учебник. –М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. ––288 с.
Евсеев М.А. Уход за больными в хирургической клинике: учебное пособие. –М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. –192 с.
Шевченко А.А. Клинический уход за хирургическими больными. «Уроки доброты»: учебное пособие для медицинских вузов. –М.: ГЭОТАР-Медиа. –2008. –416 с.
Дополнительная
Вебер В.Р. Основы сестринского дела: учебное пособие для медучилищ. –М.: Медицина. –2001. –496 с.
Венцел Р.П. Внутрибольничные инфекции (пер. с англ.) –М.: Медицина. –1990.
Общий уход за больными: учебное пособие /Под ред. В.Н.Ослопова и О.В.Богоявленской. –М.: ГЭОТАР-Медиа. –2006. –400 с.
Основы асептики и ухода за хирургическими больными: учебное пособие для медвузов /Под ред. В.И.Оскреткова. –Ростов-на-Дону: Феникс. –2007. –608 с.
Основы ухода за хирургическими больными: учебное пособие для медвузов /Под ред. А.А.Глухова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. –288 с.
Садикова Н.Б. Тысяча советов медсестре по уходу за больными. –Минск: Современный литератор. –2002. –832 с.
Уход за хирургическими больными: учебное пособие для медвузов /Под ред. Б.С.Суковатых. –М: МИА. –2007. –496 с.
Харди И. Врач, сестра, больной. Психология работы с больными (пер. с венгер.) –Будапешт. –Издательство Академии наук Венгрии. –1988.
При работе с вируссодержащим материалом необходимо выполнять следующие требования:
· не допускать рассеивания вирусов во внешней среде;
· предотвратить контаминацию (загрязнение) вируссодержащего vатериала посторонней микрофлорой;
· обеспечить личную безопасность.
Режим работы вирусологической лаборатории регламентируется законами Российской Федерации, международными правилами проведения диагностических лабораторных исследований, правилами внутреннего распорядка. Весь персонал лаборатории проходит инструктаж и обучение безопасным методам труда, обеспечивается спецодеждой, спецобувью, средствами санитарной защиты и защитными приспособлениями в соответствии с действующими нормами. Вход в производственные помещения посторонним лицам категорически запрещен. Сотрудники вирусологической лаборатории обязаны соблюдать правила работы, предупреждающие загрязнения бактериями и грибами исследуемого материала, возможность заражения персонала и распространения инфекции.
Запрещено выходить за пределы лаборатории в халатах и спецобуви или надевать верхнюю одежду на халат, курить, принимать пищу в производственных помещениях и хранить в них продукты питания. В боксе работают в стерильном халате, маске, шапочке, в некоторых случаях надевают очки и перчатки. Обязательно меняют обувь. Не допускаются хождение и разговоры во время работы.
Весь материал, поступающий в лабораторию на исследование, должен рассматриваться как инфицированный!
С инфекционным материалом следует обращаться крайне осторожно. При распаковке его банки необходимо протирать снаружи дезинфицирующим раствором и ставить их на поднос или в кювет. Рабочее место на столе покрывают несколькими слоями марли, увлажненной 3 – 5 % раствором хлорамина. Жидкости, содержащие вирусы, переливают над кюветами с дезинфицирующим раствором. При работе с пипеткой пользуются грушей. Пипетки, предметные стекла, стеклянную посуду и резиновые изделия, задействованные в работе с инфекционным материалом, обеззараживают погружением в 5 % раствор хлорамина или растворы фенола, лизола, серной кислоты. Запрещается выносить из лаборатории оборудование, инвентарь, материалы и т. д. без предварительной их дезинфекции. По окончании работы рабочее место приводят в порядок и дезинфицируют. Вируссодержащий материал, необходимый для дальнейшей работы, ставят на хранение в холодильник и опечатывают. Руки в перчатках промывают в банке с 5 % раствором хлорамина, затем перчатки снимают, обеззараживают вторично, дезинфицируют и моют.
ТРЕБОВАНИЯ К РАБОЧИМ ПОМЕЩЕНИЯМ И ОБЕСПЕЧЕНИЕ УСЛОВИЙ РАБОТЫ
Современные требования к лабораторным диагностическим комплексам и отдельным составляющим (полы, стены, потолки, системы отопления, вентиляции, водоснабжения и канализации) изложены в правилах лабораторной практики GLP.
Вирусологические отделы лабораторий и научно-исследовательских ветеринарных станций призваны осуществлять лабораторную диагностику вирусных инфекций, контролировать заболеваемость животных, вызываемую вирусами в межэпизоотический период, а также учитывать состояние и напряженность специфического постинфекционного и поствакцинального противовирусного иммунитета, участвовать в организации и проведении профилактических мероприятий в борьбе с вирусными и хламидийными заболеваниями животных в обслуживаемом регионе.
Структура вирусологической лаборатории определяется задачами и особенностями ее деятельности. Размещать лабораторию желательно в двухэтажном здании или в изолированном отсеке. Боксы предпочтительнее располагать с северной, теневой стороны здания, чтобы избежать попадания в них прямых солнечных лучей, или следует застеклить окна боксов молочным или матовым стеклом. Полы в коридорах и комнатах для сотрудников могут быть паркетными, покрытыми лаком; в остальных – из плотного, влагонепроницаемого, устойчивого к дезинфектантам материала. Деревянные полы покрывают пластиком. Стены и потолки лаборатории должны быть также устойчивыми к дезинфектантам, легко подвергаться мойке. В боксах всю площадь целесообразно отделывать кафельной плиткой. Двери боксов должны быть раздвижными. Это позволяет сэкономить площадь и избежать колебания воздуха. В плоскости двери устраивают окошко с небольшой площадкой Целесообразно иметь боксы следующего назначения: для получения и культивирования клеток – 1–2 бокса; для заражения культуры клеток – 1–2, для заражения куриных эмбрионов – 1–2 бокса; для заражения подопытных животных – 1 бокс; для вскрытия подопытных животных – 1 бокс; для склада стерильного стекла – 1 помещение.
Основные диагностические работы должны проводиться в настольных или стационарных ламинарных боксах (разного класса) с системой защиты оператора, предупреждения контаминации исследуемого материала, защиты окружающей среды от вредных и опасных выбросов.
Помещения несколько больших размеров (примерно 4х4 м) выделяют для серологических исследований, уничтожения инфекционного материала, приготовления и стерилизации лабораторной посуды и других материалов, приготовления питательных сред и растворов, а также для сотрудников.
Лаборатория (отдел) вирусологии должна быть обеспечена холодной и горячей водой, желательны подача пара и газа, наличие централизованного вакуум-провода и подачи воздуха под давлением.
Каждый бокс комплектуют соответствующей мебелью и оборудованием. Примерная схема размещения оборудования и приборов представлена на рисунке 1. Наиболее важен стол, размер которого зависит от выполняемых на нем работ. В связи с тем, что многие работы приходится выполнять вдвоем, стол рекомендуется располагать параллельно стене, чтобы два работника сидели друг против друга, или ставить его к стене в виде буквы Т, что позволяет более экономно использовать площадь стола. Шкафчики для стеклянной посуды и мелкого инвентаря можно устроить под столом или повесить на стену. Покрытие лабораторного стола должно быть устойчивым к действию дезинфицирующих веществ. Лабораторные стулья лучше всего металлические, так как они легко очищаются и дезинфицируются. Над рабочим местом устанавливают бактерицидные лампы (БУВ-30). У входа в бокс кладут резиновый губчатый коврик, пропитанный дезраствором. В предбокснике находятся стерильные халаты, колпаки, косынки, маски и тапочки, перчатки, которые надевают перед работой в боксе, и, в зависимости от назначения бокса, соответствующее оборудование (термостат, холодильник, водяная баня, центрифуга и пр.).
Рисунок 1 - Схема размещения оборудования: а – для работы с культурами клеток, б – для изготовления сред и растворов для культур клеток
Рисунок 2 - Микробиологический защитный бокс I класса:1 – вытяжной вентилятор; 2 - высокоэффективный воздушный фильтр; 3 - смотровая стеклянная панель; 4- открытый проем для рук работающего; 5 - штуцера для подводок воды, воздуха
Рисунок 3 - Бокс с ламинарной подачей стерильного воздуха:1 – газовая горелка, 2 – матрас, 3 – резиновая груша
Ограничить численность бактерий можно с помощью бактерицидных лампБУВ-15 и БУВ-30. Значительного снижения количества бактерий в воздухе боксов и предбоксников, на поверхности столов и другого оборудования можно достигнуть обработкой аэрозолем перекиси водорода и некоторых других веществ. Уборку помещений проводят влажным способом: полы, стены, мебель протирают марлей, увлажненной дезраствором.
Для вирусологической лаборатории любого типа обязательной частью оборудования должен быть настольный бокс, содержащий бактерицидную лампу, еще лучше – ламинарный шкаф с подачей стерильного воздуха (рис. 2, 3).
При работе в вирусологической лаборатории необходимо строго соблюдать методы и правила асептики и антисептики!
Асептика – система мероприятий и приемов работы, предупреждающих попадание микроорганизмов и вирусов из окружающей среды в организм человека, а также в исследуемый материал. Она предусматривает использование стерильных инструментов и материалов, обработку рук сотрудников, соблюдение особых санитарно-гигиенических правил и приемов работы.
Антисептика – комплекс мероприятий, направленных на уничтожение микроорганизмов и вирусов, способных вызвать инфекционный процесс при попадании на поврежденные или интактные участки кожи и слизистых оболочек. В качестве антисептиков используют различные химические вещества: 70%-ный этиловый спирт, 5%-ный спиртовой раствор йода, 0,5–3%-ный раствор хлорамина, 0,1%-ный раствор перманганата калия, 0,5–1%-ный раствор формалина, 1-2%-ные спиртовые растворы метиленового синего или бриллиантового зеленого.
Дезинфекция – обеззараживание объектов окружающей среды путем уничтожения патогенных для человека и животных микроорганизмов и вирусов физическими способами и с помощью химических веществ: растворами хлорной извести (0,1–-10%-ным), формалина, хлорамина (0,5-5%-ным), фенола (3–5%-ным), лизола (3–5%-ным), едкой щелочи (2–3%-ным) и др. Выбор дезинфицирующего вещества и его концентрации зависит от материала, подлежащего дезинфекции.
В лабораториях для дезинфекции боксов чаще всего применяют пары формалина (30–35 мл 40%-ного раствора формальдегида на 1 м 3 помещения), ß-пропиолактон (1,1 л на 100 м 3 помещения) или испаряют карболовую кислоту (не реже одного раза в неделю) и ежедневно делают влажную уборку с применением растворов хлорамина, гидроксида натрия и др.
Стерилизация – обеспложивание, т. е. полное уничтожение микроорганизмов и вирусов в различных материалах. Стерилизацию проводят физическими (воздействием высокой температуры, путем ультрафиолетового облучения, фильтрацией жидкостей через бактериальные фильтры) и химическими методами.
Физические методы стерилизации:
а) прокаливание в пламени спиртовки или горелки. Данный способ применяют для стерилизации препаровальных игл, петель из аппарата Такачи, пинцетов, горловин культуральных сосудов и т. д.;
б) стерилизация кипячением. Этим методом стерилизуют шприцы, мелкий хирургический инструмент, предметные и покровные стекла и другие предметы. Кипятят не менее 30 мин. Однако данный метод не обеспечивает полной стерилизации, так как некоторые вирусы, например вирус гепатита, и споры бактерий могут остаться при этом жизнеспособными;
в) стерилизация сухим жаром в сушильном шкафу. Метод основан на действии нагретого до 165–180°С воздуха. Сухим жаром стерилизуют стеклянную посуду;
г) стерилизация в автоклаве паром под давлением. Это один из наиболее эффективных методов стерилизации, поэтому он широко применяется;
д) стерилизация в аппарате Коха или автоклаве текучим паром (давление 100–150 кПа (1–1,5 атм.), экспозиция 30 мин). Применяют для стерилизации материалов, не выдерживающих воздействия высокой температуры, например питательных сред с витаминами и углеводами;
е) стерилизация ультрафиолетовыми лучами. Метод основан на бактерицидном действии УФ-лучей с длиной волны 260– 300 мкм. Для стерилизации воздуха в боксах используют лампы БУВ-15, БУВ-30. Обычно облучение проводят 1–2 ч;
ж) фильтрование жидкостей через бактериальные фильтры. Этим методом пользуются для освобождения питательных сред, сыворотки крови, витаминов и т. д. от бактерий, но не от вирусов.